熒光染料是指吸收一定波長的光波并發(fā)射出比所吸收的光波長更大的另一種光波的物質(zhì)。它們大多是含有苯環(huán)或具有共軛雙鍵的雜環(huán)的化合物。熒光染料可以單獨使用，也可以組合成復(fù)合熒光染料。

熒光標記是將熒光染料（熒光團或熒光素）選擇性共價結(jié)合或物理吸附在待研究分子（蛋白質(zhì)、多肽等）的某一基團上的方法。利用其熒光特性提供有關(guān)所研究物體的信息。

研究應(yīng)用：

熒光染料由于靈敏度高、操作方便，已逐漸取代放射性同位素作為檢測標記物，廣泛應(yīng)用于熒光免疫學(xué)、熒光探針、細胞染色等領(lǐng)域。包括特異性DNA染色，用于染色體分析、細胞周期、細胞凋亡等相關(guān)研究。許多其他核酸染料是多色染色系統(tǒng)中有用的復(fù)染劑，可作為背景對照，標記細胞核，使細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)的空間關(guān)系一目了然。

免疫分析

熒光標記單克隆抗體技術(shù)為流式細胞術(shù)在細胞膜及細胞內(nèi)各種功能抗原、腫瘤基因蛋白等領(lǐng)域的研究拓展了無限的應(yīng)用空間。熒光探針可以通過蛋白質(zhì)交聯(lián)劑與單克隆抗體共價結(jié)合。免疫熒光標記常用的染料是異硫氰酸熒光素 (FITC)、藻紅蛋白 (PE) 和 AlexaFluor 系列染料。

核酸擴增檢測

核酸熒光染料對細胞核進行染色，定量測定細胞發(fā)出的熒光強度，從而可以測定細胞核中DNA和RNA的含量，分析細胞周期和細胞增殖情況。有多種熒光染料可以對細胞中的 DNA 或 RNA 進行染色。常用的DNA染料有碘化丙啶（PI）、DAPI、Hoechst 33342等，RNA染料有噻唑橙、吖啶橙等。

染料介紹：

APDye Fluor 647（Alexa Fluor 647 等效物；AF647）是一種明亮的綠色熒光染料，適合與 633、650 nm 氬激光配合使用。該染料是水溶性的，并且在 pH 4 至 pH 10 范圍內(nèi)對 pH 值不敏感。該染料具有 4 個磺酸鹽基團，使其水溶性高，在水溶液中聚集較少。 APDye Fluor 647 用于蛋白質(zhì)和抗體標記，或高標記密度的核酸應(yīng)用。您可能對Alexa 647 nhs 酯感興趣，點擊了解更多信息。

APDye Fluor 647 在結(jié)構(gòu)上與 Alexa Fluor 647 相似，并且光譜與 Cy5 Dye、Alexa Fluor 647、CF 647 Dye 或任何其他基于 Cyanine5 的熒光染料幾乎相同。